Laboratorio de Bioquímica

  Índices Hemáticos

Describiremos a continuación la determinación de la hemoglobina y el hematocrito, que forman parte del análisis sanguíneo en la serie roja. Sin embargo, hablaremos de ellos por separado para conocer la técnica y procesamiento que requieren para su análisis, detallando luego aparte el estudio de los eritrocitos o hematíes como también se les conoce.

Indice de contenidos

Hemoglobina

Es la clave en el transporte del oxígeno, ubicada en el interior de los glóbulos rojos permite captar y transportar el oxígeno hacia los lugares de mayor necesidad. Cuando los valores para la edad y sexo caen por debajo del límite inferior se denomina anemia, haciendo la aclaración que la anemia que presentan las mujeres embarazadas, se debe al aumento del volumen circulatorio y no a una deficiencia pura en los compuestos que dan utilidad a esta proteína, aunque algunos casos de anemia se correlacionan con bajos niveles en ácido fólico, hierro y vitamina B12.

Propósito del Auxiliar de Laboratorio

Evaluar la presencia y severidad de la anemia.

En que consiste la prueba

Se realizará una dilución exacta entre la sangre y una solución que contiene ferrocianuro de potasio, esta convertirá la hemoglobina en cianametahemoglobina, esta última, puede compararse colorimétricamente con una solución control.

Muestra a requerir

Sangre venosa con EDTA o sangre capilar.

Materiales a usar

  • Tubos con EDTA
  • Guantes descartables
  • Cubetas Estandarizadas para lectura
  • Pipetas automáticas de 20ųL
  • Gradilla para tubos
  • Papel parafilm
  • Reactivo de Cianametahemoglobina
  • Estándar de hemoglobina
  • Pipeta serológica
  • Bulbo de hule

Equipo especial a usar

  • Espectofotómetro
  • Mezclador mecánico (puede ser opcional)
  • Reloj con Alarma

Procedimiento

Antes de realizar una prueba a un paciente debería calibrarse el equipo, por lo que se recomienda realizar tres muestras con el estándar de hemoglobina. Para ello, haremos uso de 3 tubos, el reactivo de cianametahemoglobina y el espectofotómetro así:

  1. Primer tubo llenar con 5 mL de Estándar puro
  2. Segundo tubo llenar a 2.5mL de Estándar puro y rellenar hasta 5mL con el reactivo de cianametahemoglobina
  3. Tercer tubo llenar con 1mL de Estándar puro y rellenarlo hasta 5mL con el reactivo de cianametahemoglobina
  4. Mezclar adecuadamente los tubos y dejar reposar por 10 minutos
  5. Leer los tubos a 540 nanómetros en el espectrofotómetro y anotar la densidad óptica
  6. Obtener la concentración de cada uno de los tubos en gramos por decilitro
  7. A cada concentración dividirla entre la densidad óptica y anotar
  8. Sumando los 3 factores se deberá sacar un promedio, este valor servirá para multiplicar y calibrar las siguientes muestras
  9. Para terminar se deberá preparar 5 mL de reactivo de cianametahemoglobina, según indique el fabricante, para mezclarlo con 20 microlitros de sangre y luego de reposar por 10 minutos deberá analizarse en el espectrofotómetro a 540nM

Con lo anterior el equipo y el laboratorio estarán listos para iniciar las pruebas en sujetos a estudio.

Posibles errores

  • Toma inadecuada de sangre
  • Torniquete mal aplicado
  • Presencia de líquido intersticial
  • Mezcla incorrecta de sangre y EDTA
  • Errores en el pipeteado o dilución
  • Muestra coagulada
  • Sangre de paciente con hiperlipidemia
  • Calibración incorrecta
  • Reactivo vencido o expuesto a la luz

Forma correcta de reportar

Reportar en todos los informes como gr/dL

Valores de referencia

Sujeto en estudio

Valor de referencia

Mujeres

12.5-15.0 gr/dL

Hombres

14.0-17.0 gr/dL

Recién Nacidos

Hasta 18 gr/dL

Niños

11.3-13.0 gr/dL

Hematocrito

Representado a manera de porcentaje, es la cantidad de eritrocitos presentes en sangre capaces de transportar oxígeno.

Propósito del Auxiliar de Laboratorio

Evaluar la cantidad de eritrocitos en sangre que transportan oxígeno, a su vez determinando en conjunto con la hemoglobina, si un sujeto padece o no de anemia, y de tenerla la severidad de la misma.

Muestra a requerir

3mL de sangre venosa o sangre de origen capilar por medio de capilares heparinizados.

Materiales a usar

  • Tubos capilares heparinizados
  • Tubos con EDTA
  • Plastilina
  • Lector de Hematocrito

Equipo a utilizar

Una micro centrifugadora de 10 mil a 13mil RPM,  para hematocrito.

Procedimiento

  • Llenar un tubo de micro hematocrito, utilizando la acción capilar o bien por una sangre mezclada con EDTA
  • Sellar adecuadamente los tubos de micro hematocrito
  • Colocar el tubo en la centrifugadora a una velocidad de 10 mil a 13 mil RPM por 5 minutos
  • Tomar una tabla de Hematocrito y hacer que coincida el nivel del plasma con el final de la marca en la tabla y el fondo de los eritrocitos precipitados coincidiendo con el inicio de la marca de la tabla
  • Leer la tabla en forma ascendente con ello determinaremos el total de mL de empacados de eritrocitos que contiene la muestra

Posibles errores

  • Tiempo prolongado entre la muestra y su procesamiento
  • Exceso de anticoagulante
  • Presencia de líquido intersticial
  • Llenado incorrecto del tubo capilar
  • Lectura de la Tabla de manera errónea
  • Incluir en la Lectura los leucocitos
  • Evaporación del plasma
  • Centrifugación inadecuada
  • Burbujas en el plasma

Forma correcta de reportar

En porcentaje del volumen total.

Valores de referencia

Sujeto de Estudio

Valor de Referencia o Normal

Hombres

42%-51%

Niños

33%-42%

Recién Nacidos

Hasta 55%

Mujeres

38%-42%

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