Química

Se describe como un proceso en el cual se encuentran microorganismos dentro de la orina, recordando que en condiciones ideales esta es  estéril.

Para poder dar un diagnóstico y tratamiento oportuno debemos tomar en cuenta las características clínicas que aunadas a un uroanálisis brinden la certeza diagnóstica que deseamos.

¿Por qué surge una infección de orina?

Como mencionamos con anterioridad la orina normalmente es estéril, sin embargo, al verse en ella microorganismos patógenos se alteran sus características. Estos microorganismos pueden llegar a las nuestras vías urinarias por diversas vías entre las que se mencionan:

1. Por la sangre
2. Por la linfa
3. Por vecindad.

En un 90% de las infecciones urinarias las provoca E.coli que pertenece al género de las enterobacterias; otro punto importante es destacar que es el sexo femenino el que es más propenso a presentar una infección del tracto urinario, esto debido a características anatómicas tales como uretra más corta, cercanía del periné con la zona genital, uso de tampones entre otros.

En centros hospitalarios, otra vía de contaminación puede ser el uso de catéteres o sistemas cerrados que provocan un 2% del total de casos de ITU (Infección del Tracto Urinario), debido principalmente a la mala técnica de instalación

De acuerdo al sitio donde se encuentre la infección podemos clasificar las infecciones así:

Infección urinaria de vías bajas: Cistitis y Uretritis.

Infección urinaria de vías altas: Pielonefritis y Absceso renal.

Para una mejor comprensión de las mismas analizaremos  brevemente cada una de ellas.

 La cistitis

Es la infección de orina más común presente en las vías bajas, solo ella representa el 90% de las infecciones bacterianas tratadas en los servicios sanitarios.

El término hace relación a la inflamación o infección de la orina contenida en la Vejiga Urinaria. Por lo general, en un 95% un solo microorganismo es el causante, describiéndose que el principal patógeno es la E.coli, seguida de Proteus mirabilis y las especies de Klebsiella.

La mayor incidencia se describe entre las edades de 18 a  39 años, además se relaciona este dato con el inicio de la vida sexual por lo que existe  un 50% de probabilidad que durante esta época se presente un evento de ITU no complicada y 44% podrían recaer.

¿Cuáles son los síntomas que presenta una cistitis?

• Escozor miccional
• Urgencia miccional
• Polaquiuria
• Dolor suprapúbico
• Tenesmo
• No hay fiebre
• No dolor en flancos
• Turbidez y mal olor en la orina
• Hematuria ocasionalmente

La Uretritis

Inflamación de la uretra, la cual puede asociarse con secreción de material purulento y escozor, puede clasificársele así:

• Uretritis No gonocócica
• Uretritis Gonocócica.

A diferencia de la comentada previamente la uretritis se reporta con mayor frecuencia en el sexo masculino, como una Infecciones de Transmisión Sexual (ITS). El microorganismo más relacionado con ella es la Neisseria gonorreae seguido en frecuencia de Chlamydia trachomatis y Ureaplasma urealyticum.

Síntomas de una Uretritis

• Dolor o ardor al orinar
• Aumento de la necesidad de orinar
• Mayor frecuencia en las micciones
• Dificultad para empezar a orinar
• Dolor durante las relaciones sexuales
• Presencia de sangre en el semen o en la orina
• Secreción de pus por la uretra.

Pielonefritis

Esta es una inflamación del parénquima renal y del sistema colector debido a un proceso infeccioso localizado en el interior del riñón o riñones.

Se puede clasificar así:

• Pielonefritis Complicada. Infección del parénquima renal, que se encuentra asociada a otra afección, por lo regular compromete la vía urinaria.
• Pielonefritis no Complicada: Infección confinada al parénquima renal y sistema colector.

Sus síntomas

Los síntomas que se han descrito en la cistitis se les denomina en conjunto Síndrome urinario o miccional además de ellos un paciente con pielonefritis presentarás:

• Fiebre >38
• Escalofríos
• Dolor en flancos
• Decaimiento o letargia
• Vómitos y náuseas.

 

 

Para la gravedad específica (GE), es necesario el uso de un urinómetro el cual se calibra de 1000 a 1060, tomando como punto de corte la gravedad del agua que es igual a 1000 a 20°C.

Por esto último es necesario determinar la temperatura de la orina para asignar la GE más adecuada, evitando con ello datos imprecisos.

 Materiales

• Tubo de ensayo
• Urinómetro.

Procedimiento

• Con una muestra de 40mL de orina
• Descienda el urinómetro en la orina
• Evalúe hasta que el urinómetro se detenga, no tocando las paredes o el fondo del tubo de ensayo
• Proceda a leer el urinómetro
• Retire el urinómetro
• Tome la temperatura de la muestra por medio de un termómetro.

Fórmula para el cálculo de GE

• Tome en cuenta la temperatura a la cual fue graduado el urinómetro
• Compare la temperatura de la orina según lo comentado en los pasos previos
• Por cada 3° C que exista de diferencia entre ambas temperaturas, agregaremos 0.001 a la GE calculada
• De modo contrario si la temperatura de la orina está 3° debajo de la temperatura de calibración del urinómetro se restará 0.001 a la GE.

Resultados

GE Normal = 1.010 a 1.025

GE Baja = menor a 1.010

GE Elevada = mayor a 1.025.

Medición del PH

Esta importante determinación química de la orina se realiza con la intención de identificar posibles causas que estén alterando el valor ácido de la orina.

Materiales

• 1 gotero
• Una pinza o tenacilla
• Frascos o lentes de reloj
• Papel indicador (pH metría)
• Orina fresca.

Procedimiento

• En un pequeño frasco o un lente de reloj, coloque un pequeño pedazo de papel indicador
• Con el gotero tome una muestra de la orina recolectada y déjelas caer de a una gota por vez sobre el papel
• Haciendo uso de una tenacilla o una pinza compara el color del trozo de papel indicador con la escala colorimétrica que trae el rollo.

Resultados esperados

pH normal: deberá ser aproximadamente de 6.0

pH ácido: de 4.5 a 5.5

pH alcalino: de 7.8 a 8.0.

Detección en el cálculo de las proteínas

Si no se cuenta con las tiras reactivas, se puede hacer uso del método químico de ácido sulfosalicilico al 30%.

El principio de esta prueba es que al agregar el ácido salicílico a la muestra de orina, se formará un precipitado blanco que representa las proteínas en dicha muestra.

Materiales

• Tubos de ensayo
• Pipeta graduada de 5mL
• Solución acuosa de ácido sulfosalicílico en proporción de 300g/L.

Procedimiento

• En un tubo de ensayo deposita 5mL de orina
• Mediante una pipeta con gotero, añade 2 gotas de solución de ácido sulsosalicílico
• Haciendo uso de un fondo negro, compare un segundo tubo de ensayo con orina sin agregarle el ácido.

Resultados

La prueba se considera positiva cuando se forma el precipitado blanco, y será negativo cuando no se forma el precipitado. Deberá reportarse de la siguiente forma:

+ …………………………. Huellas o trazas

++ ……………………….. Cantidad pequeña

+++ ……………………… Cantidad mediana

++++ ……………………. Gran cantidad.

Estudio del sedimento urinario

 Con este análisis se pretende examinar cada uno de los elementos microscópicos que se encuentran en suspensión de la orina.

La orina que sea analizada con formaldehido al 10%, que es el reactivo que se agrega al sedimento, impide que esta muestra sea utilizada en alguna otra prueba.

Materiales

• Centrifugadora eléctrica o manual
• Tubo cónico para centrifugación
• Pipeta capilar de 50gotas por mL
• Porta objetos
• Cubre objetos
• Solución de formaldehido al 10%.

Procedimiento

• Lo primero es preparar el sedimento por lo que haremos una mezcla centrifugada de la muestra de orina, para ello haremos uso de orina fresca la cual deberemos pasar a un tubo de ensayo cónico para centrifugación.
• El tiempo recomendado para centrifugación es de 5minutos.
• Haciendo uso de un frasco para análisis, vierte el contenido de la orina sin agitar el tubo de ensayo, de manera tal que el sedimento quede en el fondo del tubo de ensayo y la orina en el frasco de análisis.
• Una vez obtenido el sedimento extrae unas gotas con la pipeta y coloca una gota sobre el portaobjetos.
• Cubre la gota con el cubreobjetos.
• Examine ahora la muestra bajo el microscopio, haciendo uso primero del objetivo 10X.
• Continúe con el objetivo de 40X.

¿Qué elementos podemos encontrar?

1. Leucocitos
2. Eritrocitos
3. Levaduras
4. Trichomonas
5. Espermatozoides
6. Células epiteliales
7. Cilindros
8. Huevos y larvas de parásitos
9. Cristales.

Resultados

La mejor forma de representación de la cantidad de los elementos descubiertos es por medio de la descripción de la cantidad de células x campo, así:

Eritrocitos 

0-10 por campo 

 

10 a 30 por campo

>30 por campo

Leucocitos

0-10 por campo

10-20 por campo

20-30 por campo

Racimos de más de 20 leucocitos

Racimos de leucocitos numerosos

Levaduras

Debe tenerse mucho cuidado pues se pueden confundir con eritrocitos tienen un tamaño de más o menos 5-12micras.

Trichomonas

Tienen un tamaño de 15 micras, son redondas y móviles y con flagelos

Espermatozoides

Son encontrados ocasionalmente de un tamaño de 5 micras, con un flagelo de 50 micras muchas veces móviles.

Células epiteliales

Tienden a ser grandes y cuadradas o rectangulares.

Cilindros

 

Cilindros hialinos                                    Cilindros granulosos

           Cilindros de pus                           Cilindros de células epiteliales

                                           Cristales de grasa                                  Cilindros Sanguíneos

Huevos o larvas de microorganismos

 

 

 

Cristales

Adquieren formas geométricas uniformes, lo que los diferencias de los residuos amorfos y gránulos que no tienen forma definida. Los cristales pueden ser normales o patológicos como veremos a continuación.

Cristales de oxalato de calcio

Se presentan generalmente en orinas ácidas, formas de un sobre o correo, tamaño aproximado de 10-20micras, aunque algunas veces adoptan forma de cacahuates enteros.

Cristales de ácido úrico

Presentan generalmente una forma variada desde cuadros o forma de rosas, con un tamaño que va de los 30 a 150 micras, presentan color amarillo o rojo parduzco.

Fosfatos triples

Forma rectangular o semejante a hojas de un helecho, con tamaño de 30-150micras.

Uratos

Presentan una forma semejante a un cactus o haces de agujas  de aproximadamente de 20 micras.

Cristales de colesterol

Se presentan en forma de laminillas con forma cuadrada y con una escotadura en alguno de los lados, presentan un tamaño de 50 a 100 micras.

Cristales de Bilirrubina

Presentan diversas formas y tamaños que van desde 5micras, bastante raros de encontrar en las muestras de orina.

 

Una vez comprendida la anatomía básica y las funciones que llevan a cabo en el riñón y sus diversas porciones se describe a continuación, la fisiología de la orina para entrar en detalle luego a la evaluación de la misma a nivel de pruebas de laboratorio que es lo que nos compete.

Como vimos en los apartados anteriores cada porción de la nefrona cumple un rol valioso en la formación de la orina, y para el abordaje directo de esta temática podemos dividir la formación en 4 procesos principales:

1. Filtración glomerular: Es la primera etapa de la formación de la orina, al menos un 20% del flujo sanguíneo que llega al glomérulo es empujado por la presión arterial hacia la primera porción de la nefrona, en este lugar los elementos formes de la sangre así como el 80% del líquido que no se filtró salen por la ateriola aferente, ahora el 20% que ha pasado la nefrona se convierte de plasma a filtrado.
2. Reabsorción tubular: Debido a que solo una pequeña porción del volumen filtrado es excretado, la mayor parte de solutos, agua son reabsorbidos por los túbulos. Por medio de este proceso se regresa a la circulación sanguínea cerca de un 99% del agua, en teoría toda la glucosa y los aminoácidos. En cuanto a los electrolitos la mayor parte de sodio y bicarbonato se devuelve a la circulación y solo la mitad de la urea cumple este ciclo.
3. Secreción tubular: Por medio de este proceso las proteínas transportan activamente, iones hidrógeno, iones potasio y desechos como la urea, hacia el líquido intersticial, posteriormente estos desechos y los iones hidrógeno son llevados al filtrado para que se excreten en la orina, manteniendo de ese modo le estado ácido-base del cuerpo.

4. Concentración de la orina: Debido al ultrafiltrado que se lleva a cabo en las nefronas, la orina tiende a presentar más solutos que el mismo plasma procesado o el líquido intersticial, aquí se hace denotar la función del Asa de Henle el cual debido a sus dos porciones (descendente y ascendente) se logra que la orina que lleva al túbulo contorneado distal sea menos concentrada que el plasma.

Para ejemplificar estos 4 procesos te dejamos la siguiente imagen que explica a detalle todo el proceso.

Examen de la orina

Ya hemos conocido todo el proceso por el cual se forma la orina y las estructuras anatómicas que intervienen para ello, ahora pasaremos a la evaluación que se realiza a este fluido corporal.

El examen de orina puede ser llamado también análisis de orina, uroanálisis o prueba analítica de la orina.

Es considerada una prueba diagnóstica que es ampliamente conocida, y que se caracteriza por su accesibilidad y por su uso en el examen basal de muchas patologías o bien en el análisis de salud general de un individuo, es simple y la mayoría de veces indoloro si lo comparamos con otros análisis de fluidos corporales.

Para realizar un examen de orina necesitamos una muestra de orina, denominándose así a la cantidad de orina que deseamos de cada paciente, que normalmente deberán ser 20 cc o en dependencia de la situación clínica del paciente o requerimientos propios del laboratorio.

El análisis de la orina puede hacerse de diversas formas, pero se recomienda siempre iniciar  con el orden siguiente.

Recolección y aspecto de las muestras de orina

Antes de evaluar una muestra de orina es necesario reconocer que la manera correcta debe ser con debida limpieza, amplio plan educacional al paciente y el depósito y manejo en recipientes adecuadamente limpios y estériles, debido a que pudieran ser objeto de resultados anómalos.

De manera general la mejor orina para muestra es la de la mañana y del cuerpo de la orina, es por ello que debe explicársele al paciente que previa limpieza de los genitales proceda a orinar, luego deberá interrumpir la micción y depositar el resto de la muestra en el frasco, debidamente identificado.

Si el análisis de orina es en el volumen de 24 horas, se recomienda no exponer a la luz el frasco recolector, deberá tener una capacidad mínima de 2000mL, con tapadera y evitar la primera orina, puesto que esta por lo regular está más concentrada y podría generar falsos positivos.

El volumen ideal de muestra debe ir de 20mL como mínimo a 50mL, y puede obtenerse de 4 formas.

• Muestra seriada
• Muestra voluntaria
• Muestra por sonda
• Muestra por punción suprapúbica
• Con bolsa recolectora (niños)

Evaluación general de la orina

1. Evaluación Macroscópica

• En relación a esta evaluación debe incluirse el aspecto, que debería ser clara o con ligera turbidez.
• El olor deberá ser Sui generis, no desagradable.
• En cuanto al color, depende en algunas ocasiones el total de muestra, el color es uno de los datos que podría por si solo orientar a una patología por ello la importancia de dicha evaluación.
• Volumen, normalmente deberían excretarse entre 750 a 2000cc cada 24 horas, ante un problema renal propiamente dicho, una hemorragia severa, un grado de deshidratación extremo este parámetro podría verse alterado grandemente.

2. Evaluación Química

• En este análisis hacemos hincapié en la valoración del pH urinario, se considerará normal todo valor que ronde entre 5 y 6.5.
• Si al realizar una valoración encontramos un pH menor a 7, podemos estar ante la presencia de Cetoacidosis, ayuno prolongado, diabetes, insuficiencia renal, uso crónico de medicamentos como anfotericina, ibuprofen y salicilatos.
• En cambio un valor de pH mayor a 7, debe considerarse una deficiencia en potasio, uso de diuréticos o vómitos.

3. Evaluación Microscópica

Proteínas

• En este procedimiento podemos evaluar la presencia de proteínas, que en condiciones normales no deberían de presentarse o en escasa cantidad, para este parámetro se recomienda el uso de (+) para determinar la cantidad de proteínas en mg/dL. Así:
  • + es igual a 30mg/dL
  • ++ es igual a 100 mg/dL
  • +++ corresponde a 300 mg/dL
  • ++++ correlaciona a 1000 mg/dL.
• Existen algunos que prefieren informar la proteinuria de la siguiente manera:
  • Leve:1 a 1 gramo de proteínas tras recuento de orina de 24 horas
  • Moderada: concentración de 1-3 gramos de proteínas en 24 horas
  • Severa: concentración de 3-4 gramos de proteínas en 24 horas.

Glucosa

• En condiciones normales como vimos en el apartado previo al llevarse a cabo el proceso de reabsorción tubular y concentración final se reabsorbe la glucosa con lo que se nivela la osmolaridad de la orina.
• Cuando hablamos de pacientes no embarazadas, el umbral para que la glucosa aparezca en orina es valores en sangre mayores a 180mg/dL, sin embargo, en el embarazo debido al aumento en la filtración glomerular aumentada se reduce el umbral a 150mg/dL.

Hematuria

• Denominamos así a la presenciad de un número anormal de eritrocitos al analizar la orina
• Puede ser franca al notar una orina roja rutilante o ligera turbidez, o microscópica cuando se detectan abundantes glóbulos rojos por campo observado en la muestra.

Nitritos

• Se presentan debido a la acción enzimática proveniente de bacterias del tracto urinario, los cuales son altamente sensibles para infección urinaria
• Se presentan principalmente en bacterias como E.coli y otras gram positivas.

Células Epiteliales

• Estas se encontraran positivos al análisis cuando exista lesión de las paredes de los uréteres principalmente, aunque pueden presentarse por lesión en uretra o vejiga.
• Son sugestivos de litiasis renal.

Leucocitos

• Los glóbulos blancos aparecen ante la presencia de infección o bien ante la lesión inminente de un cálculo a su paso por los uréteres.
• En condiciones normales el recuento deberá presentar menos de 6 leucocitos por campo de evaluación.

Bacterias

• De la mano del apartado previo, la orina es considerada esteril, por lo que no deberán estar presentes.
• Sin embargo su presencia aunada a nitritos corresponde a una infección el tracto urinario.
• Toda muestra que tenga abundantes leucocitos sin presencia de nitritos en base a la clínica debemos valorar si nos encontramos frente a una contaminación de muestra más que una infección urinaria.

Hongos

• No deberían encontrase nunca
• El reporte de estos se describe como micelios por campo de observación
• Puede correlacionarse con la clínica de una candidiasis vaginal.

Espermatozoide

• Si los encontramos en mujeres, pudiera corresponder a una paciente con actividad sexual reciente.
• En el caso de los hombres puede deberse a una eyaculación reciente o un problema de eyaculación retrógrada.

 Cilindros

• Ante la presencia de proteínas y la precipitación de ellas en la orina se formarán los cilindros
• Pueden corresponder a un proceso de estasis, proteinuria franca o bien una orina concentrada.

De los 10 aspectos antes mencionados, el análisis puede realizarse por medio de una máquina automatizada o bien haciendo uso de tiras reactivas las cuales en base a una escala colorimétrica relacionan con un nivel de cada ítem previamente expuesto.

Abordaremos en el presente módulo los principales aspectos relacionados con el sistema urinario, el cual cumple un rol fundamental en la homeostasis del cuerpo humano, conoceremos la anatomía básica del aparato urinario, haremos un recorrido por la estructura del riñón con énfasis en la unidad funcional que es la nefrona y analizaremos los principales estudios que se le realizan a la orina con la finalidad de detectar enfermedades oportunamente o para conocer el progreso de algunos procesos patológicos a este nivel.

Aparato urinario

Se denomina así a la serie de órganos que trabajan en sinergia para poder producir, almacenar y transportar la orina, dicho en otras palabras el aparato urinario está formado por:

• 2 riñones
• Pelvis renales
• 2 uréteres
• La vejiga
• 2 músculos esfínteres
• La uretra
• Meato urinario.

Tras haber captado nuestro cuerpo los nutrientes, minerales, el agua y macro y microelementos necesarios para la vida, el sistema sanguíneo que repleto de desechos algunos de ellos tóxicos, los cuales deben ser filtrados para poder excretarse por medio de la orina o por las heces, es necesario señalar, que solo una pequeña fracción de estos es excretada por los pulmones y el sudor.

El principal órgano del aparato urinario es el riñón, este debe servir a manera de filtro para poder producir orina y retener los tóxicos que deben ser excretados fuera del cuerpo, esta función como se mencionaba en las primeras líneas es de vital importancia en la homeostasis del organismo, de la mano de la acción de los pulmones y la piel que permite el sudor, con todo esta maraña de procesos se logra mantenerse el balance ácido base y pH.

Otras funciones que cumple el sistema urinario son:

• Ayudan en la regulación de la presión arterial,
• Procesos de eliminación de residuos hidrosolubles del cuerpo.
• Secretan hormonas (Glándulas Suprarrenales)
• Regulan los niveles de glucosa en sangre, sobre todo en los estados de ayuno.

Estructura y función del riñón

Los riñones son dos órganos ubicados en el retro peritoneo, se sitúan a ambos lados de la región dorso lumbar de la columna vertebral, aproximadamente entre la 12ava vértebra dorsal y la 3era vértebra lumbar. Se describe que el riñón izquierdo presenta una situación más alta que el derecho.

En los polos de cada riñón se encuentran la glándulas suprarrenales, y todo el conjunto de riñón y suprarrenal respectiva se ven envueltos en una cápsula adiposa que se denomina “Gerota”.

Desde una vista externa los riñones presentan una coloración rojiza, presentan una forma similiar a una habichuela, llegan a pesar en el adulto hasta 130-150 gramos y miden unos 11 cms x 7cms x 3cms.

En la estructura de cada riñón a nivel central se encuentra el llamado hilio renal, el cual permite el paso de los nervios, vasos linfáticos y  el llamado pedículo renal,  el cual se conforma por  el complejo arteriovenoso y la pelvis renal.

Hablando de la vista interna de los riñones, está conformado por un seno renal, un parénquima renal y el sistema de vascularización. El parénquima renal se conforma a su vez de dos zonas llamadas corteza renal que es lisa y parda ubicándose hacia la periferia, mientras que en el seno se ubica la médula renal la cual presenta un color marrón.

El seno renal contiene:

• Arterias y venas renales segmentarias.
• Arterias y venas renales interlobulares.
• Ramos nerviosos principales
• Vías urinarias intra-renales
• Cálices renales menores y mayores
• Pelvis renal.

El parénquima renal es el que presenta mayor funcionalidad debido  a que en este sitio se contienen las nefronas, que como mencionábamos antes, son la unidad funcional del riñón; el parénquima se conforma de una corteza renal, que está en íntima relación con la cápsula gerota, es lisa y rojiza, mientras que en el centro se encuentra formada por la médula renal, la cual contiene alrerededor de 8-18 pirámides renales o también llamadas de Malpighi, es a este nivel  donde ubicamos a las asas de Henle, los conductos colectores y los papilares, los cuales ayudarán en el proceso de formación de la orina y captación de electrolitos y otras sustancias.

Cada nefrona presenta una cápsula llamada de Bowman, las nefronas se pueden dividir en corticales aproximadamente 80% y nefronas yuxtamedulares 20%, en este contexto cada nefrona presenta dos zonas el corpúsculo renal y el túbulo renal.

Luego de la cápsula de Bowman se encuentra el túbulo renal, mismo que presenta 4 porciones:

1. Túbulo contorneado proximal, cuya función principal es la de reabsorber el 80% de la filtración glomerular.
2. Asa de Henle, es de vital importancia para la absorción de calcio, sodio, potasio y agua.
3. Túbulo Contorneado distal, es el encargado por naturaleza de regular la taza de filtración, debido a las células especializadas que presenta.
4. Túbulo Contorneado colector, es el encargado de la homeostasis del pH sanguíneo y ayudan al contorneado distal a regular la taza y la calidad de filtración

Además de las estructuras antes mencionadas, este aparato tiene una importante inervación, vascularización y sistema de drenaje linfático, debido a la valiosa función que cumple en la figura a continuación se observan las principales arterias y organelas que conforman este intrincado sistema.

En algunos casos de emergencia, es probable que no se pueda dar tiempo al proceso de incubar los tubos, pues tenemos el tiempo contado para transfundir a un paciente.

Cuando sea así deberemos evaluar el tubo uno, llevaremos a centrifugación durante 1 minuto a baja velocidad, examinaremos a continuación bajo el microscopio.

Si no se presenta aglutinación se puede aceptar la sangre para el paciente, debiendo escribir con color y letra legible, “SANGRE COMPATIBLE SEGÚN ESTUDIO URGENTE”, con ello se expone a todo el personal que a la sangre se le están determinando más pruebas pero que de momento se considera compatible para su uso de emergencia.

Detección de donadores pertenecientes al grupo O, que pueden generar riesgos

Como se mencionó en el último párrafo, algunas situaciones en las salas de emergencia ameritan la transfusión de hemoderivados de manera urgente, por lo que las personas que son del grupo A, B o AB, pudieran llegar a ser transfundidos con sangre O debido a que es la que los bancos de sangre hospitalarios por ejemplo mantienen en mayor número.

Principio de la prueba: Haciendo uso del suero fresco del donador se deberá llevar a incubación una cantidad pequeña de eritrocitos del tipo A y del tipo B, si al titularse con anticuerpos Anti-A y Anti-B es elevada sobrevendría una hemólisis y el suero se tornará de color rojizo.

Método

• Prepararemos una suspensión de eritrocitos A al 5 % en solución de cloruro sódico y una suspensión de eritrocitos B al 5% en solución de cloruro sódico.
• Separemos ahora el suero del donador en un tubo sin anticoagulante, no debiendo usarse sangre con más de 6 horas de obtenida.
• Depositamos en dos tubos
  • Tubo 1: 9 gotas de suero fresco del donador, suspensión de eritrocitos A al 5% 1 gota y nada del tipo B
  • Tubo 2: 9 gotas del suero fresco del donante y 1 gota de la suspensión de eritrocitos B al 5%
• Lleve ahora los tubos a una incubadoras o baño maría a 37°
• Sacudimos ligeramente los tubos a fin de que se vuelva a formar una suspensión de eritrocitos
• Lleve a centrifugación un minuto a baja velocidad.

Resultados

Si el color es amarillo: se deberá observar un sedimento de eritrocitos, el individuo podría utilizarse como donador universal.

Si el color es rosáceo o rojizo: hablamos de una hemólisis en todos los tubos, o la mayor parte de eritrocitos se han reducido al sedimento, la sangre de este donador es del grupo O pero solo podrá hacerse uso en pacientes del grupo O, a esta sangre deberá agregársele la etiqueta “Donador del grupo O que constituye riesgo, úsese solamente en pacientes del tipo O”

Conservación y obtención de muestras de sangre para transfusión

La sangre que será usada para transfusiones requiere de técnicas de preservación con la finalidad de que se reduzca cualquier tipo de reacción por la descomposición de  las células.

Los Donadores

• Adulto sano
• No Menor a los 18 años
• No mayor a los 50 años
• Concentración de hemoglobina debe ser superior a 12.5 o una concentración de hierro mayor a 7.8 mmol/L
• No se aceptan mujeres embarazadas
• Pueden donar cada 4 a 6 meses
• Deberá determinarse el grupo sanguíneo por el método de los portaobjetos.

La obtención de la sangre

• Algodón y etanol
• Un esfigmomanómetro
• Un frasco para recolectar sangre
• Una aguja extractora
• Un sistema para recolección que contenga 120 mL de solución ACD
• Un objeto que el donador pueda usar para apretar e impulsar la sangre venosa al sistema.
• Una pinza
• Tijeras
• Cinta adhesiva.

Método

• Recueste al donador en un sofá o una camilla con una elevación de la cabeza con un cojín
• Prepare el sistema recolector
• Llenar los formularios de consentimiento informado y de identidad
• Realice las pruebas serológicas rápidas VIH, VDRL y Hepatitis B
• Coloque un esfigmomanómetro en la parte superior del brazo del donador, lleve la presión del manquito a 80-100 mmHg y palpe la vena a puncionar
• Limpie el área para la punción, haciendo uso de una torunda con algodón y alcohol al 70%
• Introduzca de manera gentil la aguja siguiendo el trayecto de la vena
• Cuando la sangre comience a entrar en el sistema reduzca la presión del manguito a 40-60 mmHg y mueva el sistema con cierta regularidad
• Pida al donador que presione el objeto en su mano para que aumente el flujo hacia el sistema
• Cuando se obtenga al menos 420 mL de sangre, se deberá retirar el manquita o el torniquete y se extraerá gentilmente la aguja
• Se colocará una curación o una torunda en el sitio de punción, y se le solicita al donador que doble la extremidad para ejercer presión sobre el sitio y de este modo evitar el sangrado
• Rotule la muestra obtenida
• Cite al donador para que recoja la constancia de donación y de pruebas serológicas.

Como preservar la sangre

La sangre puede ser guardada hasta 3 semanas en un frigorífico con las siguientes condiciones:

• Temperatura de 4 a 6 °C
• Tener un termostato regulador
• Si la sangre se ha guardado entre 8-10°C se deberá descartar la sangre luego de unos días.
• La sangre no se deberá guardar junto vacunas u otros reactivos
• Debe llenarse y llevarse un registro diario del uso y almacenamiento de los hemoderivados.

 

 

 

• Primero se deberá determinar el tipo de sangre.
• Se deberá realizar a tu sangre y a la del donador una prueba de compatibilidad sanguínea.
• Durante el proceso de transfusión se recomienda vigilar de cerca al receptor ante posibles reacciones, tales como fiebre, prurito (picazón), hinchazón (edema), dificultad respiratoria, entre otros síntomas; los cuales se manifiestan por lo regular en los primeros 30 minutos.

La forma de interpretar quién puede recibir y donar sangre, se puede resumir de la siguiente manera:

1. Las personas con sangre tipo A, pueden recibir transfusiones de los tipos A y O
2. Si la persona es tipo B, puede recibir sangre de los tipos B y O
3. Aquellas personas con sangre tipo AB, pueden recibir sangre de los tipos A, B y O
4. Toda persona con tipo de sangre O, solo puede recibir transfusión de un donador O
5. Si la persona presenta Rh +, puede recibir transfusiones de los que sean Rh+ o Rh-
6. Las personas que presentan Rh-, solo pueden recibir sangre de los tipos Rh-.

Clasificación de los grupos A, B y O por medio de anti sueros

El principio de esta prueba radica en determinar por medio de una mezcla de glóbulos rojos y anti sueros, la afinidad o desagregación de la sangre dando con ello una prueba positiva o negativa para cada grupo.

Muestra

Materiales

• Pipeta pasteur
• Pipeta gotero
• Vaso para análisis
• Un lápiz graso
• Solución de cloruro sódico (Reactivo No. 48)
• Tubos de ensayo de 50x11mm
• Anti sueros anti A, anti B y anti AB.

Equipo

• Centrífuga
• Eritrocitos testigos de los grupos A, B y O.

Procedimiento

Se deberá contar con una muestra de sangre venosa, la cual deberá ser en un tubo con EDTA.

• Centrifuga durante 5 minutos a alta velocidad.
• Aspire el plasma con una pipeta de Pasteur, se debe conservar para clasificar el grupo sanguíneo por medio de glóbulos rojos testigos.

Prepare una muestra de sangre coagulada de al menos 5-10 mL en un tubo de ensayo y centrifugue al menos 5 minutos a alta velocidad.

• Aspire el suero con una pipeta de pasteur y mantén conservado el suero, para clasificar posteriormente los grupos sanguíneos.

Si la sangre es capilar, en un tubo de ensayo coloca 3 gotas de solución de citrato trisódico (Reactivo No. 53).

• En el mismo tubo coloque inmediatamente 10 gotas de sangre, método ideal para niños.

El lavado de los eritrocitos

• Mezclaremos ahora 5 gotas de sedimento de eritrocitos y 2mL de cloruro sódico.
• Centrifugamos a alta velocidad.
• Añadimos nuevamente 2mL de solución de cloruro sódico.
• Agite el tubo con suavidad, de este modo se obtendrá una suspensión con glóbulos rojos al 10%.

Ejecución del ensayo

• Prepare ahora 3 portaobjetos
• En el No. 1 coloca una gota de anti suero A
• En el No.2 coloca una gota de antisuero B
• En el No.3 coloca una gota de antisuero AB
• Agregamos ahora una gota del concentrado preparado previamente, en cada porta objetos
• Haciendo uso de un mezclador o palillo de madera, mezclamos ambas gotas en cada portaobjetos preparado
• Puedes mover hacia adelante y hacia atrás el portaobjetos para mesclar adecuadamente la preparación en cada portaobjetos
• Realiza el examen visual antes de que pasen 2 minutos.

Fuentes de error

Mala preservación de los reactivos

Turbidez de los antisueros

Los reactivos y antisueros no han sido almacenados en frigorífico (4°C).

Forma de reporte

Aglutinación positiva, se formarán en la superficie del portaobjetos conglomerados de glóbulos rojos, que flotarán sobre un líquido claro, esto ocurre en menos de 2 minutos.

Aglutinación negativa, en esta reacción el porta objetos no mostrará glóbulos rojos aglutinados.

Portaobjetos 1 Anti A	Portaobjetos 2 Anti B	Portaobjetos 3 Anti AB	Grupo sanguíneo Del paciente
+	–	+	Grupo A
–	+	+	Grupo B
+	+	+	Grupo AB
–	–	–	Grupo O

Clasificación del Grupo Rhesus

Se hace un ensayo con los eritrocitos para detectar el antígeno D, para ello haremos uso del anti suero D.

Este ensayo se deberá realizar a una temperatura de 37 a 40°C, pudiendo hacerse en un portaobjetos o en un tubo de ensayo.

Haciendo uso del preparado de eritrocitos al 10% que hemos creado en la sección previa, deberemos aplicar una gota de anti suero D, se debe hacer ahora una mezcla de ambas gotas hasta que se mezclen uniformemente.

Los resultados son así:

Aglutinación = Rh Positivo, los cuales deberán formarse en al menos 3 minutos.

No aglutinación= Rh negativo

Análisis de la Compatibilidad Sanguínea.

Con esta prueba analizaremos a compatibilidad entre la sangre de un donador y la sangre del receptor, para evitar que tengamos al momento de una transfusión reacciones adversar.

Materiales

• Suero del paciente
• Eritrocitos del paciente
• Eritrocitos del donador
• Solución de cloruro sódico (Reactivo No. 48)
• Albúmina bovina al 20% (Reactivo No. 12)
• Baño maría o una incubadora a 37° c
• Una centrífuga
• Pipetas Tubos de ensayo pequeños y mediados.

Procedimiento Habitual

• Seleccione sangre de un donador apropiado.
• Prepararemos una suspensión de eritrocitos al 5%, para esto debemos rotular un tubo de ensayo con los datos del donador, depositamos ahora 4 ml de solución de cloruro sódico, a esto agregamos 3 gotas de eritrocitos del donador.
• Mezclamos bien la preparación previa.
• Lavamos los eritrocitos como lo hicimos al determinar el grupo A, B y O.
• Enumeramos ahora 4 tubos:
  • En el tubo 1 haremos compatibilidad en cloruro sódico
  • En el tubo 2 haremos compatibilidad en albúmina
  • En el tubo 3 detectaremos auto-anticuerpos en cloruro sódico
  • En el tubo 4 detectaremos auto-anticuerpos en albúmina.
• Por medio de pipetas, colocaremos en los tubos 1 y 2, 2 gotas de suero del paciente y 2 gotas de los eritrocitos al 5%.
• En el tubo 3 y 4 pondremos 2 gotas de suero del paciente y 2 gotas de los eritrocitos al 5 %.
• Mezclamos los tubos con ligeros golpes en el fondo del tubo.
• Llevaremos ahora los tubos en una gradilla a baño maría a 37° C por un tiempo de hora y media (90min).
• Añadimos a los tubos 2 y 4, 2 gotas de albúmina al 20%, sin mezclar deberemos llevar a incubar de 20 a 30 minutos.
• Observe ahora en el microscopio el sedimento de eritrocitos de cada tubo, con un objetivo de 10x para evaluar la aglutinación.

Resultados

1. No aglutinación: La sangre es compatible y se puede administrar sin riesgos al paciente receptor.
2. Aglutinación intensa o hemólisis en el tubo 1 y menor aglutinación en el tubo 2: La sangre es considerada incompatible y no debería ser administrada al receptor, se recomienda examinar de nuevo el grupo sanguíneo del paciente y el donador.
3. Solo aglutina en el tubo 1: La sangre es incompatible y no se debe administrar, a este tipo de pacientes se les dice que presentan anti cuerpos de tipo completo, se recomienda buscar otro donador, haciendo siempre pruebas entre grupos y compatibilidad.
4. Solo aglutina en el tubo 2: la sangre es incompatible y no deberemos administrarla, es muy probable que el paciente tenga anticuerpos inmunitarios, por ejemplo el anti D si es Rh negativo y hemos hecho uso de sangre Rh positiva.
5. Aglutinación en los 4 tubos: El suero del paciente contiene auto-anticuerpos. Se debe referir el caso a un laboratorio de mayor grado de especialización.
6. Reacción de Rosseaux o columna de monedas, esta reacción es difícil de distinguir ante una aglutinación verdadera, para ello podemos hacer uso de solución de cloruro sódico en los tubos donde veamos a la células con esta distribución, debiendo las mismas al entrar en contacto con el cloruro disolverse.

El Grupo Sanguíneo viene determinado para una persona por proteínas que se encuentran en la membrana de los eritrocitos (glóbulos rojos), determinando con ello cualidades específicas para estudios de compatibilidad sanguínea.

Historia de los grupos sanguíneos

Hacia el año 1900, el científico Karl Landsteiner, hizo el descubrimiento más importante sobre el Grupo Sanguíneo, dio a conocer un estudio de la sangre de al menos 20 personas además de la suya,  en el cual determinaba que existían proteínas específicas en los eritrocitos.

Las proteínas descubiertas por Karl demostraron que le conferían cualidades a la sangre, revolucionando todo concepto existente hasta esa fecha.

Posteriormente los primeros casos de transfusiones fueron descritos por el Obstetra James Blundell, quien ante la presencia de hemorragia post parto que desarrollaban sus pacientes, hizo uso de la sangre del esposo de una de las pacientes para realizar una transfusión.

Hoy en día, se sabe que existen miles de personas que desconocen qué tipo de sangre poseen, por lo que abordaremos esta sección todo lo referente para aprender lo básico sobre los grupos sanguíneos, transfusiones y la forma como se evalúan estos parámetros en el laboratorio.

A qué nos referimos con el Grupo Sanguíneo

Hace referencia a una clasificación que se le brinda  a la sangre tomando en cuenta la presencia de proteínas específicas en la superficie de los eritrocitos, pudiendo clasificar mediante el sistema ABO y el Factor Rh.

¿Qué es el sistema ABO?

Es el sistema diseñado por Karl Landsteiner, por el cual recibió el premio Novel, mediante este se clasifica el tipo de sangre:

Grupo  Sanguíneo A: Los eritrocitos contienen proteína A en su superficie.

Grupo Sanguíneo B: Los eritrocitos contienen proteína B en su superficie.

Grupo Sanguíneo AB: Los eritrocitos manifiestan proteínas A y B en su superficie.

Grupo Sanguíneo O: En el cual los eritrocitos no presentan ninguna proteína en su superficie.

¿Qué es el factor Rh?

Es una proteína también ubicada en los glóbulos rojos, esta fue estudiada por primera vez en los macacos Rhesus, de ahí su nombre.

Si al realizar un análisis del grupo sanguíneo se encuentra esta proteína en la superficie de los eritrocitos, se dice que la persona es Rh Positivo (Rh +).

Si en una prueba sanguínea la persona no presenta en sus eritrocitos esta proteína se dirá entonces que la persona es Rh Negativo (Rh -).

Tomando en cuenta los dos sistemas antes en mención, se pueden generar 8 tipos de sangre:

• A positivo
• B positivo
• A negativo
• B negativo
• AB positivo
• AB negativo
• positivo
• negativo.

La importancia de la determinación de estas características en la sangre humana, reside en que para realizar una transfusión sanguínea, es menester saber quien sería el donador ideal y quien será el receptor de dicha sangre.

Debido a lo anterior, la presencia de estas proteínas, toda persona a la que no se le realice una determinación de su tipo de sangre así como una compatibilidad sanguínea, podría terminar en reacciones adversas en el organismo que pueden incluso provocar la muerte.

¿Qué son los antígenos y anticuerpos de sistema ABO?

Los Antígenos, son también llamados Aglutinógenos en el lenguaje de laboratorio, estos se caracterizan por brindar a la sangre la capacidad de responder ante otro tipo de sangre generando una respuesta de aglutinación y hemólisis (acumulo y destrucción de eritrocitos).

Debido a que los antígenos fueron descubiertos mediante las proteínas A, B y O descritas anteriormente, reciben de igual manera los nombres de Anti-A, Anti-B   y O el cual es el único que no posee antígenos A o B.

Los Anticuerpos, son llamados Aglutininas y producen luego de haber tenido contacto con un grupo sanguíneo no compatible para el receptor por ejemplo en una transfusión.

Uno de los ejemplos más frecuentemente reportados es la denominada Sensibilización Materna, en este proceso un bebé es Rh- y la madre tiene Rh+, a consecuencia en un segundo embarazo el cuerpo materno reaccionará atacando al feto, pues se han generado anticuerpos anti Rh-.

 Los Antígenos del sistema Rh

A diferencia de los comentados en el sistema ABO, los antígenos del sistema Rh se obtienen mediante el contacto o exposición.

Se han descrito al menos 6, sin embargo, el de mayor importancia es el anti D pues el que mayores reacciones podría provocar. Se estima que al menos un 85% de las personas de raza blanca poseen el antígeno D, llamándose Rh positivo. El 15% restante se describen como Rh negativo.

Existen diferencias en cuanto a la frecuencia de aparición de este antígeno en asociación con el grupo sanguíneo, los cuales responden a factores genéticos de acuerdo a la raza y distribución geográfica.

¿Qué es incompatibilidad?

Se denomina así a una reacción en la cual el grupo sanguíneo de una persona no puede mezclarse con la que reciba de un donante. Esta reacción puede resultar de la incompatibilidad del grupo ABO o del Factor Rh.

¿Qué es compatibilidad?

Se refiere a la capacidad de mezclarse los grupos sanguíneos, teniendo en cuenta las reacciones entre antígenos y anticuerpos.

¿Qué es la tipificación de la Sangre?

Es una prueba de laboratorio en la cual se determinará el tipo de sangre del donante y del receptor, observando luego cómo reaccionan al mezclarse.

Puesto que ya hemos determinado los conceptos básicos, procederemos a conocer los siguientes términos:

Donador Universal: Debido a que en los eritrocitos del grupo O negativo no existe ninguna proteína en su superficie, no hay reacción en el cuerpo de quien reciba este tipo de sangre. Este tipo de sangre es uno de los que se encuentra en mayor proporción en los hospitales y bancos de sangre debido a que ante emergencias en la cuales no se puede realizar la compatibilidad, será la primera opción a transfundir.

Receptor Universal: Puesto que  el grupo AB positivo presenta en su superficie todas las proteínas que se conocen, le brinda la capacidad de aceptar transfusiones de cualquier grupo sanguíneo.

Importancia Clínica de la determinación del grupo ABO

Aunque en primera instancia toda la sangre se ve igual, como hemos analizado, cada grupo posee características importantes. Los brotes de enfermedades infecciosas como malaria, virus de influenza, además de infecciones bacterianas, han generado cambios en las estructuras de los eritrocitos.

• Los cambios en la estructura de los eritrocitos se cree jugarán un papel importante en la manera en la que el cuerpo humano responderá a nuevas amenazas.
• En personas que serán sometidos a terapias de trasplantes, es de suma importancia determinar el grupo y factor Rh de los pacientes con el fin de minimizar los efectos de rechazo.
• En procesos de ictericia neonatal (Elevación de bilirrubinas al nacer), el determinar el grupo sanguíneo materno y fetal permite obtener una causa probable del problema.
• En mujeres con historia de abortos a repetición, es meritorio realizar pruebas como cariotipo sanguíneo además de un test de tipo de sangre a ella y su pareja.

Cuando hablamos del estudio de los leucocitos, nos referimos al análisis de los diferenciales, los cuales tienen como finalidad obtener información de la sangre periférica.

Cuando se obtienen los resultados, podemos diagnosticar múltiples enfermedades, orientar un tratamiento en compañía del facultativo y darle seguimiento a enfermos ya tratados.

En los laboratorios clínicos se pueden utilizar diversos métodos para evaluar los leucocitos, siendo los más empleados aquellos que hacen uso de los extendidos o frotis de sangre periférica, sin embargo en pleno siglo XXI, la automatización de los procesos está ganando amplio espacio, con lo cual algunos laboratorios hacen uso de máquinas que solo precisan tener una muestra de sangre llevarla al auto-analizador y en pocos segundos se tienen resultados. Analizaremos entonces los más empleados siendo estos:

Método Longitudinal: Haciendo uso de una pipeta de pasteur, se debe colocar una gota de sangre periférica a más o menos 2 centímetros del borde de un portaobjetos, con el borde liso de un segundo portaobjetos, forma un ángulo de 30° y realiza un movimiento de deslizamiento hacia el extremo contrario de donde se colocó la gota, debiendo formarse un extendido constante y uniforme.

Método Transversal: Con una pipeta de pasteur, lleva una gota de sangre hacia la parte media de un portaobjetos, sobre dicha gota coloca un segundo portaobjetos, de manera tal que se verá extendida la sangre. Cuando note que la sangre ya no se extiende realiza un movimiento de deslizamiento del portaobjetos superior quedando entonces un extendido de sangre periférica.

Método con plumilla: Consigue una plumilla de las empleadas para dibujar (pincel), en el tubo de sangre periférica, sumerge la plumilla haz una ligera presión sobre el borde del tubo para retirar el exceso de sangre, lleva entonces ahora la plumilla hacia un portaobjetos limpio y en un ángulo de 30° desliza de manera longitudinal y con una presión gentil la plumilla, debiendo quedar una extensión del grosor de la plumilla a lo largo del portaobjetos, se recomienda realizar esto al menos 2 veces más quedando entonces 3 extendidos por portaobjetos.

Con los 3 métodos mencionados la mejor tinción es la de Wright.

El procesamiento de las laminillas

Debemos entonces llevar al microscopio las laminillas, donde deberán evaluarse en cada extensión al menos 100 células, haciendo uso en primera instancia de un objetivo de bajo aumento, lo que nos brindará una visión general del extendido, y luego ubicarnos en la región que se considere con la mejor distribución de células.

Cuando sea necesario se podrá hacer uso de los demás campos, para poder dar un informe correcto sobre el análisis diferencial de los glóbulos blancos, la forma de interpretar las observaciones es igual a lo expuesto en los apartados previos.

El equipo automatizado

Debido al auge en este tipo de ayudas tecnológicas, daremos una pincelada acerca de este equipo. Este tipo de equipos computarizados cuentan con un auto-analizador, el cual hace uso de un sistema de capilaridad que separa inteligentemente las células, para ello, emplea un rayo láser el cual al incidir sobre las diferentes células retorna con información en forma de ondas de luz, los cuales por medio de los fenómenos luminosos de absorción y dispersión indican el tipo de célula que se está analizando.

Estos equipos analizan más o menos 2500 células por segundo, y los resultados son representados como histogramas de frecuencia en relación al volumen evaluado, como verás en la imagen a continuación.

Coagulación

En el análisis de laboratorio para esta sección nos enfocaremos en 3 pruebas que aseguran brindar los mejores resultados, con la finalidad de determinar la correcta respuesta en cuanto a funcionamiento y número de plaquetas, analizando además de manera indirecta el correcto funcionamiento de los factores de coagulación dependientes de vitamina K, del metabolismo hepático y de la contractilidad capilar, veamos entonces la primera de estas pruebas.

Tiempo de Sangramiento

Propósito: Evaluar el funcionamiento y número de plaquetas, además de evaluar la contractilidad capilar.

Muestra: Sangre capilar del dedo o bien del lóbulo de la oreja.

Materiales

• Lanceta descartable y estéril
• Papel filtro
• Torundas de algodón
• Alcohol
• Guantes descartables.

Equipo

• Reloj o cronómetro.

Procedimiento

• Antes que nada deberá lavar adecuadamente las manos y hacer uso de guantes descartables
• Explique al paciente sobre la prueba a realizar
• Desinfecte el área que va a puncionar
• Puncione de preferencia el dedo índice a modo de que el sitio de punción sea transversal a la dirección de las huellas digitales
• Seque con un papel filtro cada medio minuto hasta que cese el sangrado
• Realice un secado en forma descendente o de manera circular sin tocar la piel
• Anotar el tiempo que toma el cesar el sangrado, desde el momento de realizada la punción.

Fuentes de error

• Presionar demasiado fuerte el dedo a puncionar haciendo que fluya más sangre
• Rozar el papel filtro a la piel
• Una punción inadecuada
• Que se olvide el horario en el cual se realizó la punción
• Punción del área seleccionada cuando aún está húmeda el área.

Forma de reporte

Reportar el tiempo de sangrado en minutos y segundos

Valores de referencia

1-4 minutos

Tiempo de coagulación, Método De Lee y White

Propósito: Evaluar de una manera global la vía intrínseca de la coagulación.

Muestra: Sangre venosa

Materiales

• Guantes descartables
• Tubos 12×75 mm
• Jeringas descartables
• Torundas de algodón
• Alcohol etílico al 70%
• Torniquete.

Equipo

• Baño maría a 37° C
• Termómetro
• Reloj o cronómetro
• Marcador.

Procedimiento

• Lavar adecuadamente las manos, una vez secas hacer uso de guantes descartables
• Identificamos el tubo con los datos del paciente y con el nombre de la prueba a realizar
• Explicamos al paciente sobre el procedimiento
• Desinfectar el área a puncionar
• Obtener una muestra de sangre venosa, con una jeringa de 5mL estéril
• Ponemos en marca el cronómetro
• Vierta 1centímetro de sangre en 3 tubos, y haciendo uso de una gradilla para tubos llévelos a baño maría a 37°C
• Invertir cada tubo en un tiempo de cada medio minuto sin agitar, hasta que se logre invertirse el contenido sin derramarse
• Tomar el tiempo de coagulación de cada tubo
• Realizar un promedio del tiempo entre los 3 tubos.

Fuentes de error

• Material mal lavado
• Baño maría más caliente de lo normal
• No cumplir con los tiempos indicados
• Derramar el contenido de sangre de los tubos.

Forma de reporte

Se debe reportar el tiempo en minutos.

Valores de referencia

De 5 a 10 minutos.

Tiempo de Retracción y Lisis del Coágulo

Con esta prueba medimos el tiempo en el cual la sangre intacta (sin anticoagulantes o agregados) se ve formada en coágulo y en cuanto tiempo este se puede disolver (lisis)

Muestra: Sangre venosa de 3 a 5mL

Materiales

• Guantes descartables
• Tubos 12×75 mm
• Jeringas descartables
• Torundas de algodón
• Alcohol etílico al 70%
• Torniquete.

Equipo

• Baño maría a 37° C
• Termómetro
• Reloj o cronómetro
• Marcador.

Procedimiento

• Coloque los tubos en la gradilla para tubos, y déjelos en baño maría a temperatura ambiente
• Examine el coágulo a la hora, dos horas, tres horas y 4 horas
• El coágulo sigue siendo sólido en las primeras 4 horas
• Transcurridas las 4 horas deberá revisar el coágulo (Debería haberse retraído y la masa de glóbulos rojos se hallará separada del suero amarillo.

Fuentes de error

• Demasiado calor en el baño maría
• Tubos mal higienizados o con anticoagulante
• Mala toma del tiempo.

Resultados Normales

La retracción normal, del coágulo será rojo y se ve separado completamente, se puede apreciar como en la parte más alta se adhiere a la superficie interior del tubo de ensayo.

En el fondo del tubo se observa un pequeño sedimento de glóbulos rojos, su espesor no debe superar los 5mm.

La retracción anormal, puede verse en 4 formas así:

1. En el fondo del tubo se formará un pequeño coágulo rojo, que solo algunas veces se adhiere a la superficie inferior, veremos por arriba como los glóbulos rojos rodean al coágulo y por arriba veremos el plasma y suero.
2. Se puede formar un coágulo rojo, el cual se adhiere casi completamente a toda la superficie del tubo y que se retrae poco, el suero es sumamente poco.
3. Puede que se produzca un coágulo amarillo, esto equivale al plasma coagulado, debajo de este se observa un coágulo rojo ligeramente retraído.
4. Puede ocurrir que no se forme coágulo alguno o que se forme pero muy pobre, esto puede observarse en pacientes con hemofilia.

Forma de reportar

Deberá hacer uso de la palabra anormal o normal, y describir las características del coágulo tal como te hemos explicado previamente.

Tiempo para la lisis del coágulo

Deberá evaluar el coágulo desde las 12 horas de iniciado el proceso hasta 72 horas posteriores al mismo, con esto deberemos observar como los eritrocitos se sedimentan hacia el fondo del tubo de ensayo.

Valores de referencia

Tiempo normal de lisis: 72 horas o más.

Disminución del tiempo de lisis: 1-48 horas.

En algunas afecciones fibrinolíticas agudas el coágulo podría disolverse en 1-4 horas.

 

Retracción Normal.

 

 

 

Retracción anormal.

 

 

 

Retracción anormal

 

 

Como describimos en apartados previos, los leucocitos son células completas que representan menos del 1% del volumen circulante, son también llamados glóbulos blancos, estos pueden verse afectados de tal manera, que la respuesta inflamatoria e inmunológica del individuo se ve disminuida.

Por ello, estudiaremos las principales alteraciones de estos valiosos elementos formes, debiendo tener en cuenta que se debe conocer el número, forma y función normales para encontrar las alteraciones al realizar el frotis. Las alteraciones de estos elementos pueden ser:

Por su forma y tamaño

En este apartado encontramos los conceptos de Leucocitosis, cuando el recuento de glóbulos supera el límite superior para la edad del paciente, esto puede deberse a la presencia de infecciones, intoxicaciones, alteraciones en el metabolismo y en algunas anemias de tipo aplásicas, así como en leucemias.

Debemos reconocer que durante la infancia y durante el embarazo suele haber una elevación en el recuento de leucocitos o secundario al intenso ejercicio que puede desarrollar un atleta de alto rendimiento.

En este sentido, las leucocitosis más comunes son las Neutrofilias (Aumento los neutrófilos y las Linfocitosis (Aumento de los linfocitos).

Contrario a lo comentado previamente, la Leucopenia, hace referencia a la disminución en el recuento de glóbulos blancos, al igual que en el apartado previo, la condición más frecuente es la Neutropenia, generalmente provocado por los fármacos principalmente captopril, indometacina, y algunos antibióticos.

Eosinofilia: este es el término que indica el aumento de los eosinófilos, esta condición no varía con respecto al origen étnico del paciente, puede dividirse en 3 grupos:

• Media o mínima, cuando el recuento estimado ronda entre los 350-1500 por μL
• Moderada cuando el recuento ronda los 1,501 a 5,000 por μL
• Severa o marcada cuando el recuento supera los 5,000 por μL.

Generalmente las eosinofillias  aparecen cuando se manifiesta una enfermedad por parásitos, seguidas en porcentaje por las alergias, variando la estadística de acuerdo al área donde resida el paciente.

Eosinopenia: hace referencia a la disminución, con relación al valor mínimo esperado para la edad. Se sabe que en el embarazo y durante el trabajo de parto pueden sufrir un claro descenso, debido a fenómenos de degranulación.

La eosinopenia se considera rara y cuando se presenta generalmente pasa desapercibida, pero se ha encontrado relacionada a casos de Síndrome de Down, tumor del timo, aplasias puras de los eosinófilos, procesos autoinmunes entre otros.

Basofilia: Este término corresponde al aumento en el recuento de los basófilos en base a la edad y al valor máximo para ello. La presencia de basofilia es altamente sugestiva de un problema de tipo mieloproliferativo.

Basopenia: Nos referimos con este término al recuento disminuido en el número de basófilos al realizar la estimación total para un individuo. En algunas publicaciones, este fenómeno se correlaciona con la ovulación y es relativamente frecuente en la urticaria.

Linfocitosis: Es el término que se le acuña al aumento de linfocitos en la estimación total de un paciente.

Linfocitopenia: Contrario al concepto previo, en este caso el recuento de linfocitos es inferior al valor que debería tener una persona de acuerdo a su edad. En los recién nacidos cobra vital importancia, debido a que un recuento de 2.800 por μL es altamente sospechoso de una inmunodeficiencia severa. Similar a lo observado en pacientes con VIH.

Monocitosis: De esta manera se llama a los casos en donde se encuentra un recuento mayor al esperado por edad en cuanto a los monocitos. Estos últimos suelen elevarse en pacientes neonatales o en pacientes en gestación.

Monocitopenia: Es el término que define una condición hematológica en la cual hay disminución en el recuento de monocitos en sangre, esto puede observarse en pacientes que reciben cortico esteroides y en aquellos que padecen de una infección aguda debido a las endotoxinas. 

 Leucopoyesis: Este es el nombre que recibe la formación fisiológica (Normal) de los elementos de la serie blanca a partir de las células pluripotenciales.

Granulocitopoyesis: Este nombre recibe la formación de los granulocitos también llamados polimorfonucleares, que están representados por los neutrófilos, eosinófilos y basófilos. Todo proceso que se altera los precursores de estas células debe diagnosticado dado que en procesos como las leucemias, el pasar desapercibidamente una célula blanca con anormalidades puede tener consecuencias nefastas.

Mieloblasto: Se denomina así a la célula de tipo mieloide más inmadura, presenta generalmente un diámetro de 10 a 18 μm, tienden a colorearse en su citoplasma de un azul intenso, poseen núcleo redondo, presenta una zona clara a nivel de la región que rodea al núcleo, siendo este de gran tamaño pues por lo regular ocupa 3/5 partes de la célula. El núcleo de un mieloblasto puede contener hasta seis nucléolos los cuales presentan tamaño mediano, se encuentran bien delimitados  y presentan un borde de cromatina.

Deberían observarse normalmente solo un 0.1 a 3.5% de estos precursores leucocitarios, por lo que encontrarlos en un frotis habla posiblemente de una leucemia mieloblástica aguda hasta que se demuestre lo contrario.

Promielocito: Esta es considerada la célula de mayor tamaño entre los precursores de glóbulos blancos, poseen un tamaño de más o menos 12-20 μm. Se diferencia del mieloblasto además del tamaño, en que este presenta gránulos azurófilos que se colorean de azul o púrpura al aplicar las tinciones de Romanowski así como con tinción de Wright.

El núcleo es redondeado, situado habitualmente de manera excéntrica, tiene una cromatina un tanto más gruesa que el mieloblasto y sus nucléolos son más definidos y en menor cantidad.

Podemos clasificar las principales alteraciones en los eritrocitos de la siguiente manera:

• Por Tamaño

Anisocitosis: Hace referencia a los eritrocitos de diferentes tamaños. Puede observarse en pacientes transfundidos.

 

Microcitosis: Se llama así a los eritrocitos de menor tamaño. Las personas que pueden presentarlos generalmente presentan talasemias y anemias ferropénicas.

 

Macrocitosis: Contrario al anterior estos eritrocitos presenta un mayor tamaño. Generalmente aparecen en hepatopatías crónicas y en pacientes con alcoholismo.

 

Macroovalocitos: Son eritrocitos de forma ovalada y sin la claridad central habitual. Por lo general surgen en anemias megaloblásticas, cuando existe carencia de vitamina B12 o ácido fólico.

 

• Por Color

Anisocromía: A estos hematíes se les conoce por la falta de uniformidad en la coloración. Pueden estar presentes en pacientes transfundidos o con anemias carenciales.

 

Hipocromía: Son todos aquellos eritrocitos pálidos y con claridad central. Característicos de las anemias ferropénicas.

 

Hipercromía: Estos hematíes se caracterizan por estar intensamente coloreados. Son fácilmente distinguibles anemias hereditarias y megaloblásticas.

 

• Por Forma

Acantocitosis: Es la presencia de hematíes con espículas irregulares, muy frecuente en cirrosis hepáticas.

 

Equinocitosis: Son hematíes con espículas cortas e irregulares, pero puede deberse también de artefactos. Aparecen en hepatopatías neonatales y uremias así como en el Síndrome de HELLP, en pacientes embarazadas con preeclampsia severa.

 

Dianocitosis: Estos hematíe tienen forma de diana. Se encuentran presentes en talasemias, hepatopatías, hemoglobinopatías y anemias ferropénicas.

 

Drepanocitosis: Son eritrocitos con forma falciforme. Están presentes en anemias falciformes y después de hipoxia.

 

Eliptocitosis: Son los hematíes con forma elíptica u oval. Es común verlos en  talasemias y anemias ferropénicas o megaloblásticas.

 

Esferocitosis: Hematíes pequeños, esféricos y muy coloreados. Presentes en anemias hemolíticas, esferocitosis hereditarias, hemoglobinas inestables y en pacientes que han sido transfundidos.

 

Esquistocitosis: Estos hematíes se encuentran fragmentados. Pueden encontrarse en pacientes con quemaduras graves, anemias hemolíticas o pacientes con prótesis de válvula en el corazón, esta es otra de las formas vistas en pacientes con Preeclampsia Severa (Condición propia de las Embarazadas).

Estomatocitosis: Son todos aquellos eritrocitos con una hendidura en la región central en forma de boca, también pueden ser artefactos. Suelen verse en los frotis de  pacientes alcohólicos o con hepatopatías crónicas.

 

Excentrocitosis: Los hematíes que presentan su hemoglobina concentrada en uno de los  extremos.

 

Keratocitosis: Los hematíes sufren una distorsión en su estructura tomando la forma de un casco.

 

Dacriocitos: aspecto de lagrima. Presentes en talasemias, anemias severas, megaloblásticas y ferropénicas, además de en alteraciones de médula ósea.

 

Otras patologías que se pueden presentar en los eritrocitos son:

Cuerpos de Heinz: Se llaman así las pequeñas granulaciones que se sitúan en la periferia del hematíe, son de color violeta y aparecen en enfermedades congénitas que presentan una inestabilidad en la hemoglobina.

 

Cuerpos de howell-jolly: Esta condición corresponde a un residuo nuclear de un eritroblasto dentro del eritrocito maduro. Suelen aparecer en anemias megaloblásticas y en pacientes esplectomizados.

 

Cuerpos de pappenheimer: Se denomina así a los acúmulos de hemosiderina, generalmente en pacientes esplectomizados.

 

Punteado basófilo: Esta condición se caracteriza por agregados ribosómicos de color azul dispuestos en la superficie del hematíe. Suelen presentarse por  intoxicación por plomo, talasemias y leucemias.

 

Anillos de cabot: En esta condición patológica se encuentran restos de membrana nuclear, microtúbulos con forma de anillo en la periferia celular. Suele presentarse en anemias megaloblásticas.

 

Inclusiones parasitarias: Algunos parásitos poseen la capacidad de atravesar la pared celular de los hematíes. Por ejemplo plasmodium falciparum que provoca “Malaria”.

 

Rouleaux: En esta situación los hematíes se apilan formando una especie de monedas. Es frecuentemente observado en pacientes con mieloma múltiple y en poliglobulinémia.